期刊简介

               本刊由著名泌尿外科专家吴阶平、郭应禄院士任名誉主编,聘请国内泌尿界知名专家、教授担任顾问及编辑委员会委员。该杂志为泌尿外科专业学术期刊,刊登国内外最新的泌尿外科疾病的诊断及最先进的治疗方法等。                

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  • 杂志名称:现代泌尿外科杂志
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:西安交通大学
  • 国际刊号:1009-8291
  • 国内刊号:61-1374/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:西安交通大学期刊中心评为优秀进步奖(02)期刊收录:知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
现代泌尿外科杂志2013年第02期

人单核细胞趋化因子-1基因重组卡介苗的构建与鉴定

李杜渐;徐耀庭;韦芳;李惠明;黄汝强;许晓文;顾炜;顾伟平

关键词:卡介苗, 单核细胞趋化因子-1, 膀胱肿瘤, 基因重组
摘要:目的 构建能自动分泌性表达单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的重组卡介苗.方法 分别以卡介苗(BCG)和人MCP-1cDNA为模板,通过PCR扩增得到120 bp的BCG Ag85B信号肽基因序列和300 bp的MCP-1基因序列.将上述两片段基因序列插入大肠杆菌-卡介苗穿梭质粒pMV261,得到重组质粒pMV261-Ag85B-MCP-1.测序鉴定完毕后,用电穿孔法将该重组质粒导入BCG中,构建重组卡介苗rBCG MCP-1.分别应用PCR扩增和Western blot检测rBCG MCP-1中MCP-1的基因和蛋白的表达.结果 质粒pMV261-Ag85B MCP-1用双酶切和PCR扩增及测序鉴定证实克隆基因BCGAg85B信号肽和MCP-1正确插入载体pMV261.Western blot显示rBCG MCP-1的培养上清和菌体中均可检测到MCP-1蛋白的表达.ELISA法可检测到培养上清中有高表达的MCP-1蛋白(340 pg/mL).结论 成功构建了能分泌MCP-1的新型重组卡介苗rBCG MCP-1,为进一步研究其抗膀胱肿瘤的疗效打下了基础.